PESQUISA DE MUTAÇÃO DIT NO GENE FLT3 - LMA


Sinonimo   PCR FLT3, LMA cariótipo normal ; DIT FLT3
Material   sangue total
Volume   10,0 mL
Método   DNA-PCR /DIGESTÃO ENZIMÁTICA
Volume Lab.   10,0 mL
Rotina   Diária
Código SUS  
CBHPM   0.00.00.00-0
Resultado   9 dia(s)
Temperatura   Refrigerado
Coleta   NECESSÁRIO O ENVIO DA AMOSTRA, ACOMPANHADO DO PEDIDO MÉDICO A AMOSTRA DEVE SER COLHIDA EM TUBO DE EDTA TAMPA ROXA COM VOLUME ENTRE 4-5ml DE SANGUE PERIFERICO OU MEDULA ÓSSEA EM EDTA. NÃO ENVIAR AMOSTRAS COAGULADAS E/OU HEMOLISADAS.
Interpretação   Nota1- FLT3-DIT ocorre entre o exon 14-15 e envolve o domínio justamembrana do receptor. Nota2 - A mutação FLT3-DIT resulta na fosforilação autônoma e conseqüente ativação constitutiva do receptor FLT3, com subseqüente ativação das vias MAPK kinase e PI3K/Akt. Nota3 - A identificação e quantificação da mutação do tipo DIT, aloca o paciente portador da mutação para o grupos de risco diferenciado. Nota4- Esta metodologia não determina a proporção alelo mutado/alelo normal (taxa alélica). Entretanto pacientes com FLT3-DIT mutado (perda do alelo normal) apresentam carga alélica de FLT3 >50%. Rotina: Amostras são submetidas à reação em cadeia da polimerase (DNA-PCR) para amplificação dos exons 14 e 15 do gene FLT3. Na reação total, controles positivos, negativos e de PCR são incluídos. Os produtos de PCR são visualizados após eletroforese em gel 3% agarose e documentados através de um sistema de transiluminação. Para o fragmento selvagem (wild type – wt) um produto de amplificação de 332pb é esperado. Fragmentos acima de 332pb são considerados sequências mutadas do tipo DIT.
Referência